Яна Гладких с детства обладала артистическими способностями и с 12 лет мечтала стать адвокатом. Для развития навыков публичных выступлений она посещала детскую театральную студию под руководством Игоря Яцко, где проучилась шесть лет. В 2007 году поступила в Школу-студию МХАТ и уже на втором курсе сыграла Лизу Калитину в спектакле «Дворянское гнездо» на сцене МХТ им. Чехова.

Первая роль в кино у Яны была эпизодической в драме «Жестокость» во время учебы. В 2021 году актриса снялась в сериале «Чиновница», где появилась обнаженной.